外泌体作为机体天然信息传递的载体,在细胞之间的通信中发挥着重要作用。由于蛋白质是外泌体的重要组成部分,分析外泌体的蛋白质组成对推动外泌体的功能研究具有重要意义。基于质谱技术的蛋白质组学,为外泌体蛋白质的研究提供了强有力的技术支持。通过对外泌体蛋白质的全面研究,我们可以深入探讨外泌体及其蛋白质在生命活动中的重要角色,并发现与疾病相关的蛋白质,从而为疾病的早期诊断和预后评估提供生物标志物。
尊龙凯时为客户提供外泌体非标记定量蛋白组学(如DIA、Labelfree)及同位素标记定量蛋白组学(如SILAC、iTRAQ、TMT)等专业服务。
同位素标记定量蛋白组学
iTRAQ(同位素标记进行相对和绝对定量的多重标记方法)和TMT(串联质谱标记)是当前广泛应用的蛋白质定量方法。这两种方法通过化学标记实现,其原理相似,但由于生产商的不同(iTRAQ由ABSciex生产,TMT由Thermo Fisher生产),它们在标记规格和分子结构上存在差异。通过这两种方法,可以有效检测低丰度的蛋白质,包括胞外蛋白、膜蛋白、胞浆蛋白和核蛋白等,并支持同时处理多个样本,确保结果的准确性,适用于比较蛋白组分析及差异蛋白的鉴定。
SILAC技术
SILAC(通过氨基酸的稳定同位素标记)基本原理是通过细胞培养,使天然同位素(轻型)或稳定同位素(中型/重型)取代相应的氨基酸。经过5-6代传代后,稳定同位素将完全掺入新合成的蛋白质中。混合不同标记的细胞或蛋白后,可通过质谱鉴定。如果峰值呈现为1:1,说明该蛋白质含量无差异;如重型氨基酸标记的组中峰值较高,表明该蛋白质的含量较高。SILAC方法的优点在于高效的蛋白标记和在6-8代传代后的高灵敏度,能够检测低丰度蛋白质的含量变化及翻译后修饰,同时样本需求量小,通常每个样本只需几十微克,但缺点是实验周期较长。
非标记定量蛋白组学
Labelfree(非标记)蛋白质定量是利用液质联用技术将蛋白质酶解成多肽进行质谱分析,通过计算蛋白肽段的鉴定数和色谱峰面积进行相对定量。该方法的优势在于不需要昂贵的标记,可以简化样本处理过程,降低人为和系统误差。然而,数据分析相对复杂,重复性较差,并对仪器的稳定性和重复性要求较高。通过在样本中添加已知含量的标准蛋白,亦可实现绝对定量。
DIA技术
DIA(数据非依赖采集)是近年来备受关注的质谱采集技术之一,属于非标记技术。DIA的原理是在质谱数据采集时,按照高速循环的方式对每个采集窗口内的所有母离子及其碎片进行全扫描。这种方法相较于传统的Label-free技术具有显著优势,能够高效测定复杂样品中相对低丰度的蛋白分子,显著提升定量分析的可信度。
服务流程
客户可以提供各种体液样本,如血清、血浆、脑脊液、尿液、胸水、腹水、唾液、细胞上清以及植物样本等,也可以提供已经提取好的外泌体。根据后续研究的目的和方法,样本前处理要求各异。
尊龙凯时是一家致力于开发外泌体精确诊疗产品的创新型生物科技公司。公司现已成功开发多种技术平台,包括血液循环蛋白标志物的发现与诊断、功能性外泌体原料的规模化生产与纯化,以及基于蛋白支架的靶向递送外泌体的平台。此外,我们还提供多系列产品以加速外泌体研究,现有货架产品超过50个,涵盖外泌体检测、保存及递送等全方位服务。
公司为国家科技中小型企业,获得了众多荣誉和成果,包括7项国家发明专利和4项实用新型专利,参与的多项研究结果发表在众多知名期刊上,如《Molecular Therapy》和《Cells》。选择尊龙凯时,助力您的生物医疗研究与创新。